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大鼠線粒體呼吸鏈復合物II(complex II)試劑盒ELISA使用說明書@產品頻道

點擊次數:713    發布時間:2020/11/9 14:12:52

· 上 傳 者: 上海極威生物科技有限公司

· 上傳時間:2020/11/9 14:12:52

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· 所屬分類:應用方法

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 11月9日報道,大鼠線粒體呼吸鏈復合物II(complex II)試劑盒ELISA使用說明書@產品頻道介紹,本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中大 鼠線粒體呼吸鏈復合物II(complex II)的含量。 l

有效期:6個月 l

保存條件:2-8℃ l

本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床診斷

大鼠線粒體呼吸鏈復合物II(complex II)試劑盒ELISA使用說明書@產品頻道實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠線粒體呼吸 鏈復合物II(complex II)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測 抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在 酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠線粒體呼吸鏈復合物II(complex II)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

大鼠線粒體呼吸鏈復合物II(complex II)試劑盒ELISA使用說明書@產品頻道注意事項

1. 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中 不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響 OD 值。

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞 試劑盒中反應試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。

大鼠線粒體呼吸鏈復合物II(complex II)試劑盒ELISA使用說明書@產品頻道試劑準備試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

大鼠線粒體呼吸鏈復合物II(complex II)試劑盒ELISA使用說明書@產品頻道操作步驟

1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本 50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙 上拍干,如此重復洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。

7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內,在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

elisa試劑盒用戶:ELISA實驗中溫育溫度有哪幾種?

極威生物解答:溫育常采用的溫度有 43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經1-2小時,產物的生成可達頂峰。為加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更為徹底,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜,以形成*多的沉淀。但因所需時間太長,在ELISA中一般不予采用。

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