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· 資料簡介: HOK 人正常口腔角質(zhì)細(xì)胞 Catalogue No.: C1366 Product Format: a T25 flask Culture Properties:貼壁 Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%雙抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY. Components Item Specifications a T25 flask 2X106 Manual 1 copy Operation steps for cell culture 1. 吸走用于培養(yǎng)基,加入 3-5mL PBS 后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞; 2. 吸干凈 PBS 后加入 1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表 面,培養(yǎng)瓶放 37 度培養(yǎng)箱消化; (細(xì)胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或 者傳代后不長。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止 消化到細(xì)胞完全漂浮。混勻細(xì)胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。) 3. 加入 6-8ml 完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細(xì)胞混勻; 4. 將混勻的細(xì)胞 1000rpm(約 150g)離心 3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸 37 度培 養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng); 傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定,大部分細(xì)胞適用 1:3-1:4 傳代,生長較慢的細(xì)胞可以 1:2 傳代。 Cell cryopreservation 1.凍存液:92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實驗室條件自行選擇) 2.降溫步驟:4 度 10min,-20 度 2h,-80 過夜后液氮保存。Tips: 1. 細(xì)胞經(jīng)過運(yùn)輸后,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞si亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。貼壁細(xì)胞 可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900-1000rpm(約 150g)離心 3min,棄上清。加 5ml PBS 重懸細(xì)胞,再 900-1000rpm(約 150g)離心 3min,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸接種到新的培 養(yǎng)瓶。第二次 PBS 重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略 PBS 重懸的步 驟;如果碎片很多,建議 PBS 多洗幾次。 2. 細(xì)胞生長不均時,可以將細(xì)胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代。 3. 細(xì)胞生長緩慢時,可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)(zui高不超過 20%),也可以根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài), 選擇傳代細(xì)胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。 4. 不同細(xì)胞貼壁性差異比較大,所以消化時間差別較大,20s-10min 均有可能,具體以細(xì)胞消化到 相互分離但未脫落,并可以輕輕吹下為準(zhǔn),嚴(yán)禁消化到細(xì)胞完全漂浮。客戶消化過度導(dǎo)致細(xì)胞死 亡、漂浮、生長緩慢,不提供免費(fèi)售后服務(wù)。 5. 干冰發(fā)貨均為兩支,客戶先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若 客戶同時復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方不提供免費(fèi)售后服務(wù)。 6. 細(xì)胞狀態(tài)正常時,應(yīng)盡快凍存細(xì)胞保種,凍存后應(yīng)隨機(jī)抽取一支檢測凍存效果。我方不對客戶凍 存細(xì)胞導(dǎo)致死亡負(fù)責(zé),客戶凍存細(xì)胞死亡不提供免費(fèi)售后服務(wù)。 Notice: 客戶收到細(xì)胞有任何疑問請及時致電我們,細(xì)胞收到后 1 周內(nèi)沒有任何電hua,或其他形式回訪, 默認(rèn)為細(xì)胞質(zhì)量沒問題,之后出了任何問題不給予免費(fèi)售后。細(xì)胞免費(fèi)售后只提供一次,若重發(fā)后再 次培養(yǎng)死亡不再免費(fèi)補(bǔ)發(fā),細(xì)胞收貨時已經(jīng)死亡或密度不足的除外。 其他相關(guān)產(chǎn)品介紹: 現(xiàn)G&VS12050 青鏈霉素混合液 100毫升 現(xiàn)G&VS12051.1 精制胎牛血清 100/200毫升 現(xiàn)G&VS12051.2 新生牛血清 500毫升 現(xiàn)G&VS12051.3 無激素精制胎牛血清 100毫升 G&VS12110 胰蛋白酶中和液 100毫升 G&VS10069 細(xì)胞培養(yǎng)病毒污染溶斑法結(jié)晶紫染色試劑盒 20次 現(xiàn)G&VS10070 細(xì)胞培養(yǎng)病毒污染溶斑法中性紅染色試劑盒 20次 現(xiàn)干G&VS10088.1 通用型細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體屬鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測試劑盒 20次 現(xiàn)干G&VS10088.2 細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體熒光染色鑒定試劑盒 20/100次 G&VS10088.3 細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.fermentans鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測試劑盒 20次 G&VS10088.4 細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.hyorhinis鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測試劑盒 20次 G&VS10088.5 細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.orale鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測試劑盒 20次 G&VS10088.6 細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.hominis鑒定16S rDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒 20次 G&VS10088.7 細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.arginini鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測試劑盒 20次 G&VS10088.8 細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體A.laidlawii鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測試劑盒 20次 G&VS10089 細(xì)胞培養(yǎng)抗支原體污染試劑盒 10次 G&VS10107.1 細(xì)胞脂質(zhì)生成比色法定量檢測試劑盒 G&VS10107.2 地塞米松細(xì)胞脂肪誘導(dǎo)生成比色法定量檢測試劑盒 20次 G&VS10107.3 異丁甲基黃嘌呤細(xì)胞脂肪誘導(dǎo)生成比色法定量檢測試劑盒 20次
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