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人抗中性粒細胞核周抗體（pANCA Ab）ELISA 檢測試劑盒

人抗中性粒細胞核周抗體（pANCA Ab）ELISA 檢測試劑盒

價格：電議 型號：

原產地：中國大陸發布時間：2022/6/7 13:45:18

人抗中性粒細胞核周抗體（pANCA Ab）ELISA 檢測試劑盒；
試劑盒采用間接法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人抗中性粒細胞核周抗體（pANCAAb）捕獲抗原的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成*終的黃色。

采購度：151

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標簽：人抗中性粒細胞核周抗體（pANCA   Ab）ELISA   檢測試劑盒   

詳細內容

本公司6月7日13時43分報道：（http://www.app17.com/c110001/products/d11444056.html）
人抗中性粒細胞核周抗體（pANCA Ab）ELISA 檢測試劑盒
使用說明書
 檢測原理

試劑盒采用間接法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人抗中性粒細胞核周抗體（pANCA  Ab）捕獲抗原的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底  物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用 下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人抗中性粒細胞核周抗體（pANCA Ab）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度

（OD  值），計算樣品濃度。
 樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于

-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 自備物品
1.酶標儀（450nm）
2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱

 操作注意事項

1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。

2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3. 預處理后的樣本無需稀釋，直接取 10μL 加樣即可。

4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
 試劑盒組成
 
名稱
96 孔配置
48 孔配置
備注

微孔酶標板
12 孔×8 條
12 孔×4 條

無

標準品
0.3mL
0.3mL

無

樣本稀釋液
6mL
3mL

無

檢測抗體-HRP
10mL
5mL

無
20×洗滌緩沖液
25mL
15mL

按說明書進行稀釋

底物A
6mL
3mL

無

底物B
6mL
3mL

無

終止液
6mL
3mL

無

封板膜

2 張

2 張

無

說明書

1 份

1 份

無

自封袋

1 個

1 個

無
注：標準品濃度依次為：8、4、2、1、0.5、0 ng/mL.

 試劑的準備

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

 洗板方法
1. 手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置 1min 后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板 5 次。

2. 自動洗板機：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

 操作步驟

1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL；

3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL，再加樣本稀釋液 40μL；

4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體  100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。


7. 每孔加入終止液 50μL，15min 內，在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

 結果判斷


繪制標準曲線：在 Excel 工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD 值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

 試劑盒性能
1. 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數 R 值，大于等于0.9900。
2. 靈敏度：檢測濃度小于 0.1 ng/mL。
3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性：板內變異系數小于 10%、板間變異系數小于 15%。

5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6 個月
 免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。

 本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷

更新時間：2024/5/24 11:45:35

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