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價格：電議 型號：
原產地：中國大陸發布時間：2022/6/6 15:09:12
采購度：155
本公司6月6日15時10分報道：（http://www.app17.com/c110001/products/d11442229.html）
人抗中性粒細胞抗體（ANA）ELISA 檢測試劑盒
使用說明書
檢測原理
試劑盒采用間接法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人抗中性粒細胞抗體（ANA）捕獲抗原的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色， TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人抗中性粒細胞抗體（ANA）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于
-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1.酶標儀（450nm）
2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 預處理后的樣本無需稀釋，直接取 10μL 加樣即可。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
| 名稱 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 備注 |
| 微孔酶標板 | 12 孔×8 條 | 12 孔×4 條 | 無 |
| 標準品 | 0.3mL | 0.3mL | 無 |
| 樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
| 檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
| 20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 無 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 無 |
| 終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
| 封板膜 | 2 張 | 2 張 | 無 |
| 說明書 | 1 份 | 1 份 | 無 |
| 自封袋 | 1 個 | 1 個 | 無 |
注：標準品濃度依次為：8、4、2、1、0.5、0 IU/mL.
20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置 1min 后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板 5 次。
2. 自動洗板機：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。
操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL；
3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL，再加樣本稀釋液 40μL；
4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板 5 次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μL，15min 內，在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。
結果判斷
繪制標準曲線：在 Excel 工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD 值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數 R 值，大于等于0.9900。
2. 靈敏度：檢測濃度小于 0.1 IU/mL。
3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性：板內變異系數小于 10%、板間變異系數小于 15%。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6 個月
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷
更新時間：2024/5/24 11:45:35
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王小姐
