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細胞P38激酶總活性光度法定量檢測試劑盒酶標儀測定

點擊次數:1013   發布時間:2021/6/24 18:04:59

細胞P38激酶總活性光度法定量檢測試劑盒酶標儀測定

 

1)樣品總活性測定

1. 96孔板上做好相應標記:背景對照和樣品

2. 分別移取xx微升緩沖液(Reagent C96孔板

3. 分別加入xx微升酶促液(Reagent D

4. 分別加入xx微升反應液(Reagent E

5. 分別加入xx微升底物液(Reagent F

6. 輕輕搖動96孔板

7. 30℃溫度下孵育3分鐘

8. 分別加入xx微升陰性液(Reagent G待測樣品(100微克細胞裂解懸液蛋白)到相應孔(注意:樣品須清澈

9. 輕輕搖動96孔板

10. 即刻放進酶標儀檢測:0分鐘讀數和5分鐘讀數

11. 活性計算:

 

1) 樣品非特異活性測定

檢測開始前,移取xx微升緩沖液(Reagent C1.5毫升離心管,分別加入xx微升專性液(Reagent H)待測樣品(注意:100微克細胞裂解蛋白),混勻后,放進30培養箱里孵育30分鐘。然后繼續下列操作。

1. 96孔板上做好相應標記:待測樣品

2. 移取xx微升緩沖液(Reagent C96孔板

3. 加入xx微升酶促液(Reagent D

4. 加入xx微升反應液(Reagent E

5. 加入xx微升底物液(Reagent F 

6. 輕輕搖動96孔板

7. 30℃溫度下孵育3分鐘

8. 加入40微升上述預處理的待測樣品

9. 輕輕搖動96孔板

10. 即刻放進酶標儀檢測:0分鐘讀數和5分鐘讀數

11. 活性計算:

 

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