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點擊次數:1013 發布時間:2021/6/24 18:04:59
細胞P38激酶總活性光度法定量檢測試劑盒酶標儀測定
1)樣品總活性測定
1. 在96孔板上做好相應標記:背景對照和樣品
2. 分別移取xx微升緩沖液(Reagent C)到96孔板里
3. 分別加入xx微升酶促液(Reagent D)
4. 分別加入xx微升反應液(Reagent E)
5. 分別加入xx微升底物液(Reagent F)
6. 輕輕搖動96孔板
7. 在30℃溫度下孵育3分鐘
8. 分別加入xx微升陰性液(Reagent G)或待測樣品(100微克細胞裂解懸液蛋白)到相應孔里(注意:樣品須清澈)
9. 輕輕搖動96孔板
10. 即刻放進酶標儀檢測:0分鐘讀數和5分鐘讀數
11. 活性計算:
1) 樣品非特異活性測定
檢測開始前,移取xx微升緩沖液(Reagent C)到1.5毫升離心管,分別加入xx微升專性液(Reagent H)和待測樣品(注意:100微克細胞裂解蛋白),混勻后,放進30℃培養箱里孵育30分鐘。然后繼續下列操作。
1. 在96孔板上做好相應標記:待測樣品
2. 移取xx微升緩沖液(Reagent C)到96孔板里
3. 加入xx微升酶促液(Reagent D)
4. 加入xx微升反應液(Reagent E)
5. 加入xx微升底物液(Reagent F)
6. 輕輕搖動96孔板
7. 在30℃溫度下孵育3分鐘
8. 加入40微升上述預處理的待測樣品
9. 輕輕搖動96孔板
10. 即刻放進酶標儀檢測:0分鐘讀數和5分鐘讀數
11. 活性計算:
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