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點(diǎn)擊次數(shù)：1180 發(fā)布時(shí)間：2021/1/25 9:50:54
A20 小鼠B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
Catalogue No.: C346
Product Format: a T25 flask
Culture Properties：半貼壁(貼壁弱，消化時(shí)間短)
Complete Growth Medium: 89%1640+10%FBS+1%雙抗
Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Application: Cells ａnd cancer research
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
A20 小鼠B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞-新品介紹
Components
| Item | Specifications |
| a T25 flask | 2X106 |
| Manual | 1 copy |
A20 小鼠B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞-新品介紹
Operation steps for cell culture
1. 輕輕吹勻細(xì)胞，收集懸液1000rpm(150g左右)離心3min，棄上清；
2. 用新的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，均勻分為幾份，接種到新的培養(yǎng)瓶中，并補(bǔ)加足量的完全培養(yǎng)基；
（細(xì)胞比較依賴(lài)細(xì)胞密度，細(xì)胞傳代及傳代后密度不宜過(guò)低，過(guò)低可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢或者死亡。細(xì)胞傳代培養(yǎng)基不能完全變黃，不然細(xì)胞狀態(tài)變差會(huì)導(dǎo)致傳代失敗。傳代過(guò)程吹打細(xì)胞應(yīng)盡量輕柔，不應(yīng)吹出過(guò)多氣泡。）
3. 將細(xì)胞放回37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不，具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。
Cell cryopreservation
1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）
2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過(guò)夜后液氮保存。
Tips：
1. 細(xì)胞經(jīng)過(guò)運(yùn)輸后，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900-1000rpm(約150g)離心3min，棄上清。加5ml PBS重懸細(xì)胞，再900-1000rpm(約150g)離心3min，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時(shí)碎片比較少，傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗幾次。
2. 細(xì)胞生長(zhǎng)不均時(shí)，可以將細(xì)胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代。
3. 細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢時(shí)，可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)（高不超過(guò)20%），也可以根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，選擇傳代細(xì)胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
4. 不同細(xì)胞貼壁性差異比較大，所以消化時(shí)間差別較大，20s-10min均有可能，具體以細(xì)胞消化到相互分離但未脫落，并可以輕輕吹下為準(zhǔn)，嚴(yán)禁消化到細(xì)胞完全漂浮。客戶(hù)消化過(guò)度導(dǎo)致細(xì)胞死亡、漂浮、生長(zhǎng)緩慢，不提供免費(fèi)售后服務(wù)。
5. 干冰發(fā)貨均為兩支，客戶(hù)先復(fù)蘇支，若復(fù)蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶(hù)同時(shí)復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳，我方不提供免費(fèi)售后服務(wù)。
6. 細(xì)胞狀態(tài)正常時(shí)，應(yīng)盡快凍存細(xì)胞保種，凍存后應(yīng)隨機(jī)抽取支檢測(cè)凍存效果。我方不對(duì)客戶(hù)凍存細(xì)胞導(dǎo)致死亡負(fù)責(zé)，客戶(hù)凍存細(xì)胞死亡不提供免費(fèi)售后服務(wù)。
A20 小鼠B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞-新品介紹
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