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（酶聯(lián)免疫法）說明書
【產(chǎn)品名稱】
中文名稱：三碘甲腺原氨酸定量測(cè)定試劑盒 （酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Quantitative Diagnostic Kit for 3,5,3’-triiodothyronine（ELISA）
【型號(hào)規(guī)格】
本試劑盒為48T/96T盒
三碘甲腺原氨酸定量測(cè)定elisa試劑盒說明書-價(jià)格/規(guī)格-GIVEI生物
【預(yù)期用途】
本試劑盒用于定量測(cè)定犬血清中三碘甲腺原氨酸含量。
甲狀腺是犬主要的分泌激素腺體之，能分泌甲狀腺素（T4）和三碘甲腺原氨酸（T3）。血液循環(huán)系統(tǒng)甲狀腺激素的水平，常常反映甲狀腺的功能。
本試劑盒適用于各種酶標(biāo)儀。
三碘甲腺原氨酸定量測(cè)定Elisa試劑盒說明書-價(jià)格/規(guī)格-GIVEI生物
【檢驗(yàn)原理】
試劑盒采用酶聯(lián)免疫分析方法。采用生物素標(biāo)記T3，純化的抗T3抗體包被微孔板，在竟?fàn)幰种品磻?yīng)中，定量的固相抗體與生物素標(biāo)記T3及非標(biāo)記抗原（校準(zhǔn)品或標(biāo)本）進(jìn)行抑制竟?fàn)幏磻?yīng)，抗體與生物素標(biāo)記的T3結(jié)合量受非標(biāo)記抗原量所抑制，非標(biāo)記抗原量多,抗體與生物素標(biāo)記的T3結(jié)合就少，反之結(jié)合就多；反應(yīng)平衡后，形成固相抗體-生物素化T3，再加入酶標(biāo)記的親和素，形成固相抗體-生物素化T3 -HRP-親和素復(fù)合物。經(jīng)加底物顯色后，用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值）。隨著T3濃度的升高，OD值逐漸下降呈良好的線性關(guān)系。本試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、操作簡單、快速等特點(diǎn)，對(duì)血清中T3的減少或升高有可靠的檢出性能。
三碘甲腺原氨酸定量測(cè)定Elisa試劑盒說明書-價(jià)格/規(guī)格-GIVEI生物
【主要組成成份】
| 組份/規(guī)格 | 96T | 48T |
| 預(yù)包被板 | 12孔/條×8條 | 12孔/條×4條 |
| 生物素-T3 | 6ml/瓶×1瓶 | 3ml/瓶×1瓶 |
| 酶標(biāo)親合素 | 6ml/瓶×1瓶 | 3ml/瓶×1瓶 |
| 校準(zhǔn)品套 | 1ml/瓶×5瓶 | 1ml/瓶×5瓶 |
| A液 | 7ml/瓶×1瓶 | 3.5ml/瓶×1瓶 |
| B液 | 7ml/瓶×1瓶 | 3.5ml/瓶×1瓶 |
| 終止液 | 7ml/瓶×1瓶 | 3.5ml/瓶×1瓶 |
| 濃縮洗滌液 | 15ml/瓶×1瓶 | 15ml/瓶×1瓶 |
| 說明書 | 1份 | 1份 |
| 粘膠板 | 2塊 | 2塊 |
| Log-log雙對(duì)數(shù)紙 | 1份 | 1份 |
| 密封袋、干燥劑 | 套 | 套 |
T3校準(zhǔn)品濃度；
| 單位 | S1 | S2 | S3 | S4 | S5 |
| ng/ml/ | 0.5 | 1.0 | 2.0 | 4.0 | 8.0 |
| nmol/l | 0.77 | 1.54 | 3.07 | 6.14 | 12.29 |
各組份應(yīng)在使用充分搖勻。
【儲(chǔ)存條件及有效期】試劑盒保存于2～8℃。有效期為十二月，請(qǐng)?jiān)谠噭┖袠?biāo)注的“有效期至”日期內(nèi)使用。
微孔板打開后應(yīng)置有干燥劑的封口袋中密封防潮保存。
【適用儀器】各種型號(hào)酶標(biāo)儀，必配450nm濾光片，選配600-630nm濾光片。
【樣本要求】取血樣后分離血清，2~8℃保存不超過48小時(shí)，長期保存可凍存于-20℃。
三碘甲腺原氨酸定量測(cè)定Elisa試劑盒說明書-價(jià)格/規(guī)格-GIVEI生物
【試驗(yàn)方法】
1、 將各種試劑移至室溫（18~25℃）平衡半小時(shí)，取濃縮洗滌液，根據(jù)當(dāng)批檢測(cè)數(shù)量，用蒸餾水1：20稀釋，混勻后備用。
2、 將預(yù)包被板從密封袋中取出，設(shè)個(gè)空白對(duì)照孔，不加任何液體；每個(gè)校準(zhǔn)品設(shè)2孔；除空白孔外所有孔加入生物素化抗原50ml，混勻，貼上不干膠封片，置37℃溫育60分鐘。
3、 手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置10甩干，重復(fù)3次后拍干。
洗板機(jī)洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。
4、 每孔加入酶標(biāo)親和素50ml（空白對(duì)照孔除外），混勻，貼上不干膠封片，置37℃溫育30分鐘。
5、 手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置10甩干，重復(fù)3次后拍干。
洗板機(jī)洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。
6、 每孔加顯色劑A 50ml，顯色劑B 50ml，振蕩混勻后，置37℃避光顯色15分鐘，每孔加終止液50ml。
7、 用酶標(biāo)儀讀數(shù)，單波長酶標(biāo)儀需先用空白對(duì)照孔調(diào)零點(diǎn)，然后測(cè)定各孔吸光值。
【對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的解釋】
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理：以各校準(zhǔn)品的OD值為縱軸（log對(duì)數(shù)坐標(biāo)）,濃度為橫軸(log對(duì)數(shù)坐標(biāo)),在對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出待測(cè)標(biāo)本的T3含量(ng/ml)。或用電腦擬合雙對(duì)數(shù)直線回歸方程式，根據(jù)樣品的OD值，計(jì)算出樣品的濃度。方程式為:log[OD]=Blog[濃度]+A
【檢驗(yàn)方法的局限性】
樣本嚴(yán)重溶血可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1、靈敏度：靈敏度：0.5 ng/ml(0.76nmol/L)
2、精密度：變異系數(shù)CV≤15%
3、劑量反應(yīng)曲線線性：不低于0.980
4、交叉反應(yīng)
| 反應(yīng)因子 | 配制濃度 | 測(cè)量值 |
| T4 | 5000 ng/ml | ≤ 0.5ng/ml |
| rT3 | 500 ng/ml | ≤ 0.5ng/ml |
【注意事項(xiàng)】
1、試劑盒宜存放于2～8℃。
2、預(yù)包被板須密封防潮。
3、做實(shí)驗(yàn)必須將試劑盒恢復(fù)至室溫（18~25℃），加試劑應(yīng)先搖勻，加樣中應(yīng)避免交叉污染。
4、溫育反應(yīng)過程中必須貼粘膠板。
5、不同批號(hào)試劑不能混用。
6、試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn)。
原創(chuàng)作者：上海極威生物科技有限公司
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